牛热休克蛋白70ELISA试剂盒 灵敏度高

【摘要】：热休克蛋白70（HSP70）是一种结构高度保守的多肽，属于热休克蛋白家族，主要由α螺旋和β折叠构成，具有“片段化"的特点。其分子量约为70kDa，但存在分子量为68、72、73、75、78kDa等的20多种蛋白，均属于HSP70家族。HSP70能够通过易化变性蛋白的修复，帮助新合成的多肽键的生理折叠与伸展，以及纠正多肽链的错误折叠等途径，使细胞的功能和结构得到恢复。它参与蛋白质从合成到降解的所有生命过程，在蛋白质合成过程中的正确折叠、蛋白质跨膜转运以及多蛋白复合物的组装中起着重要作用。

检测原理：试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被热休克蛋白70（HSP-70）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的热休克蛋白70（HSP-70）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

试剂的准备：

 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

洗板方法：

1.  手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。

2.  自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

牛热休克蛋白70ELISA试剂盒 灵敏度高需要但未提供的材料及耗材：

  1、酶标仪

2、精密移液器及一次性吸头

3、蒸馏水

4、洗瓶或者自动洗板机

5、37℃水浴锅或恒温箱

6、500ml量筒

7、无粉一次性乳胶手套

牛热休克蛋白70ELISA试剂盒 灵敏度高常见问题解答：

为了帮助您更好的解决在实验中可能碰到的各种问题，上海轩泽康生物设计了这些问题指导，配以试剂盒内的说明书一起供您参考使用：

1.     问：ELISA试剂盒是否可以分批使用？

上海轩泽康生物解析：可以分批使用，试剂盒内酶标板都是可拆卸的。

2.     问：ELISA实验整个过程需要多久？

上海轩泽康生物解析：从实验方法来看，双抗体夹心法实验需要约3.5~4小时，竞争法实验需要2-2.5小时。这个时间是单纯的上机时间，不包括样本采集时间和样本处理时间。

3.     问：说明书上的检测限不适用怎么办？

上海轩泽康生物解析：我们的试剂盒检测限都是根据常规样本定标，如遇低于检测限的特殊样本可以联系我司客服咨询定制检测限。

4.     问：为什么建议样本和标曲做复孔？

上海轩泽康生物解析：①求平均值，确保实验结果的准确性。②防止跳孔。③对自己的操作进行评估。④对试剂盒性能进行评估。

5.     问：样本反复冻融对ELISA测试结果有影响吗？

上海轩泽康生物解析：尽量避免反复冻融，收集处理完样本后分装冷冻。多次冻融易引起蛋白降解，测试出值水平下降，相对趋势减小。

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